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Microstructure Observation of Metals

금속조직의 상, 결정립의 형상과 분포, 크기 및 결함 등의 분석을 위하여 광학현미경이 주로 사용되고 있습니다.

이런한 분석을 위하여 광학현미경을 사용함에 있어, 다음과 같이 고려해야 할 사항이 있습니다.

첫째로, 광학 현미경은 초점심도가 매우 작기 때문에, 아주 작은 굴곡이라도 있는 샘플은 관찰하는 영역 전체를 한번에 초점정합을 할 수가 없게 됩니다. 하기의 표의 수치를 보면, 대물렌즈의 초점심도는 매우 짧고, 배율이 커질수록 더 짧아지기 때문에 관찰하는 샘플(시료)의 관찰면은 더욱 더 평탄해야 합니다.

depth of focus of objective lenses
depth of focus of objective lenses

금속 조직의 미세구조를 관찰하기 위해서 샘플(금속)의 단면을 균일하게 연마를 해야 하는 이유입니다.

둘째로, 샘플의 관찰면이 대물렌즈 광로와 정확한 수직인 면에 정합하기 편한 Inverted Microsocpe가 주로 사용되어 집니다.

셋째로, 금속조직의 경계가 명확하지 않을 경우에는 샘플 제작시 부식 등의 방법으로 경계를 강조한 후에 현미경으로 검경을 하게 됩니다.

이러한 사용에 있어 적합한 현미경의 검경법(Microscopy)을 이해하면, 관찰하고자 하는 샘플의 특성을 추정할 수 있습니다.

Bright Field Microscopy

경계가 명확하고, 명암이 분명한 샘플의 경우에 사용되어지는 가장 기본적인 관찰법입니다.

분석을 위한 이미지 개선을 위해서는 샘플이 반응하는 빛의 파장대를 고려해 볼수 있습니다. 효과적인 파장대를 파악할 수 있다면, 경계에 대한 강조가 용이하게 되어 분석의 정확도도를 올릴 수 있습니다.

Dark Field Microscopy

Bright Field는 샘플에 빛을 조사하여, 반사되어 돌아오는 빛을 그대로 사용하는 검경법입니다만, Dark Field는 샘플에 조사된 광(직접광)이 대물렌즈로 돌아가지 못하도록 설계되어 있습니다.

직접광에 의해 발생하는 회절광(간접광)만이 대물렌즈로 들어가게 하는 검경법(Microscopy)을 Dark Filed라고 말합니다. 이 회절광은 단차나 스크레치, 파티클(균열, 식각된 입자경계 등)에서 발생하기 때문에, 평탄한 영역에서는 회절 현상이 발생하지 않아 그저 어둡게 보이기만 하고, 회절이 생긴 영역은 마치 별처럼 밝게 보입니다.

빛의 입사각에 따라 유리창의 먼지가 어느 순간 강조되어 보이는 경우가 이와 비슷한 원리라 할 수 있습니다.

Simple Polarizing Microscopy

간이 편광 관찰법은 샘플(시료)의 편광특성이 다른 재질들이 섞여 있는 시료의 구분을 위하여 사용되어지는 검경법입니다. 흔히 사용되어지는 상용 합금은 편광특성이 구별이 되지 않는 경우가 많긴 하지만, 다양한 소재의 관찰을 하는 경우에는 단순한 조작으로 큰 효과를 얻을 수 있는 관찰법입니다.

DIC(Differential Interference Contrast)

미세 굴곡의 변화를 명암으로 표시하는 것을 목적으로 하는 검경법입니다. 샘플에 입사하는 광을 2개로 분리한 후에 발생하는 광경로의 차이가 발생한 2개의 광을 다시 하나로 합하는 구조로 간단히 설명할 수 있습니다. 다시 합해졌을때 소멸 및 보강간섭등의 효과를 이미지에 반영하는 관찰법입니다.

LACTOBACILLUS INSPECTION

유산균 관찰용 현미경

일반 광학 현미경의 관찰법(Bright Field)으로는 얇은 세포와 조직은 투명하여 배경과 구별이 잘 되지 않습니다. 이러한 문제를 해결하기 위해 샘플을 염색하여 관찰합니다만, 살아있는 샘플의 관찰이 필요한 경우에는 염색을 할 수 없습니다. (염색은 살아있는 샘플을 손상을 일으킵니다.)

이러한 살아있는 샘플의 관찰을 위하여 하기와 같은 다양한 관찰법들이 고안되었으며, OLYMPUS의 CX43은 소형 현미경이지만, 하기의 이미지와 같이 다양한 관찰법을 사용할 수 있어서 유산균 관찰과 같은 폭넓은 영역에서 사용되어 지고 있습니다.

다양한 관찰법을 사용 가능한 유니버설 콘덴서
CX43은 유니버설 콘덴서를 탑재해 명시야 관찰, 암시야 관찰, 위상차 관찰, 형광 관찰, 간이 편광 관찰 등 다양한 관찰법에 사용가능합니다. 콘덴서는 2X에서 100X까지의 대물렌즈와 조합하여 관찰이 가능하고, 터렛 회전이나 탑 렌즈의 이동과 같은 번거로운 작업 없이 관찰 시간을 절약하고 조작의 실수를 줄일 수 있습니다.

관찰 스타일에 따른 크렌멜 제공
2개의 표본 동시에 끼워 비교하면서 관찰할 수 있는 크렌멜을 표준 장비해, 다양한 종류의 표본에 대응하고 있습니다. 옵션인 플레인 크렌멜은 표본을 홀더에 끼울 필요 없이 단지 표본을 시트 위에 놓기만 해도 쉽게 표본 이동이 가능합니다.

Aperture 조리개 조작으로 콘트라스트 강조
상기 이미지에서 우측 이미지와 같이 Aperture 조리개를 좁히는 것으로 contrast를 강조하는 효과를 얻을 수 있습니다.

Specification for CX43 ( OLYMPUS )
Specification for CX43 ( OLYMPUS )

CX43에 사용되는 카메라는 감도가 좋은 모델을 사용하시는 것이 좋습니다.
(하기와 같은 이유로 획득된 이미지가 밝지 못한 경우가 생기기 때문입니다.)
– 조명장치가 충분히 밝지 않음.
– 카메라로 가는 이미지 소스가 50%만 전달됨
Dark Field위상차 관찰법은 간접광을 이용하거나, 링슬릿을 사용하기 때문에 Bright Field Microscopy에서 얻어지는 결과물에 비교하면 매우 어두운 관찰법입니다.